JJF(皖) 165-2023 实时荧光定量PCR仪校准规范

安徽省地方计量技术规范
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标准编号:JJF(皖) 165-2023

标准名称:实时荧光定量PCR仪校准规范

英文名称:Calibration Specification for Real-Time Fluorescent Quantitative Polymerase Chain Reaction Analyzer

发布日期:2023-08-03

实施日期:2023-10-01

归口单位:安徽省医化计量技术委员会

起草人

徐俊(安徽省计量科学研究院)、王成(安徽医科大学第一附属医院)、汪鹏飞(安徽医科大学第一附属医院)、何淑莲(安徽省计量科学研究院)、贾雪怡(安徽省计量科学研究院)、贺晓辉(安徽省计量科学研究院)、吕吉(安徽省计量科学研究院)、李征(北京林电伟业电子技术有限公司)

起草单位

安徽省计量科学研究院、安徽医科大学第一附属医院、北京林电伟业电子技术有限公司

标准范围

实时荧光定量PCR仪,全称为实时荧光定量聚合酶链反应分析仪(real-time fluorescent quantitative PCR analyzer,RFQ-PCR,以下简称实时荧光定量PCR仪)是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,同时通过标准曲线对扩增基因进行定量分析的仪器。标记有荧光染料的探针与模板基因混合后,完成高温变性、低温复性和适温延伸的热循环后,与模板基因互补配对的探针被切断,荧光染料游离于反应体系中,在特定光激发下荧光染料发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化的荧光信号强度,既可对待测扩增基因进行定量分析。

实时荧光定量PCR仪均热块一般有32孔板、48孔板、96孔板和384孔板等几种类型,其中96孔板应用最为广泛。如图1所示,其主要由温度控制模块、微量荧光检测模块、均热块、电脑控制系统、计算机及应用软件组成。

本规范适用于实时荧光定量PCR仪的校准,其他类型PCR仪相同原理部分可参照本规范执行。

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